怎样选择适合你实验需要的HRP标记抗体？

　　HRP标记抗体由于性质和所使用的储存条件不同，其存储的“保质期”可能从几周到几年不等。一些诊断性抗体被证明经过12-26年在4°C的储存能保持其功能。每个抗体存储的最佳条件是不一样的，然而我们还是可以总结抗体存储的一些建议和一般准则。抗体的储存时间取决于抗体固有的性质和储存条件。抗体(尤其是酶)必须存放在适当的温度和pH值范围。
 

　　怎样选择适合你实验需要的HRP标记抗体？
 

　　1.一抗选择要点：
 

　　a.确定抗体的名字。注意中英文名字、它名、亚型等信息。
 

　　b.确定你的实验类型。Elisa，WB，IHC，ICC，还是FACS。一般抗体的说明书都会列出该抗体经验证过适用于何种实验的类型，如果抗体说明书没有提及的应用类型，并不意味着该抗体不适用于此种分析应用类型，而仅是说明尚未经过此种实验验证，请根据说明书列出的已验证的类型来选择适合你实验的抗体。
 

　　c.确定实验样本的种属。Human，Mouse，还是Rat。一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种物种实验，请根据说明书列出已验证的种属来选择适合你实验的抗体。
 

　　d.样本蛋白的结构性质。了解样本蛋白的结构性质有助于选择最合适的抗体，待测样本蛋白的结构域和样本在提取和处理过程中是否会变性，蛋白空间构象的改变，会影响抗体的免疫亲和反应。
 

　　e.HRP标记抗体的选择。市面上的抗体还是以多克隆抗体为主，一般HRP标记抗体特异性强，但亲和力相对小，检测抗原灵敏度相对就低；而多克隆抗体特异性稍弱，但抗体的亲和力强，灵敏度高，但易出现非特异性染色(可以通过封闭等避免)。
 

　　2.二抗选择要点：
 

　　a.种属来源。主要根据一抗种属来源来决定购买二抗来源，如一抗是小鼠来源，那二抗就买抗小鼠的即可(羊、兔等均可)。
 

　　b.标记物的选择。有HRP、Biotin、荧光素等标记物。一般SP三步法二抗选择Biotin标记的二抗，以与后面的SP结合反应，而免疫荧光染色就需要购买不同荧光素标记的二抗。