单克隆抗体的使用有着必须遵从什么方法

　　单克隆抗体技术的基本原理：要制备单克隆抗体需先获得能合成专一性抗体的单克隆B淋巴细胞，但这种B淋巴细胞不能在体外生长。而实验发现骨髓瘤细胞可在体外生长繁殖，应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与免疫的淋巴细胞二者合二为一，得到骨髓瘤细胞。这种细胞继承两种亲代细胞的特性，单克隆抗体既具有B淋巴细胞合成专一抗体的特性，也有骨髓瘤细胞能在体外培养增殖永存的特性，用这种来源于单个融合细胞培养增殖的细胞群，可制备抗一种抗原决定簇的特异单克隆抗体。

 

　　单克隆抗体即把产生抗体的B淋巴细胞与多发性骨髓瘤细胞进行融合，形成杂交瘤细胞。既有骨髓瘤细胞无限生长的能力，又有B淋巴细胞产生抗体的功能。能在细胞培养中产生大量单一类型的高纯度抗体。单克隆抗体技术的应用，是免疫学中的一次革命，与常规的多克隆抗体，特异性更强，灵敏度更高，并且便于大规模重复生产，*性非常明显。目前已广泛应用于科研、检测、医药等各个领域。即把产生抗体的B淋巴细胞与多发性骨髓瘤细胞进行融合，形成杂交瘤细胞。既有骨髓瘤细胞无限生长的能力，又有B淋巴细胞产生抗体的功能。能在细胞培养中产生大量单一类型的高纯度抗体。单克隆抗体技术的应用，是免疫学中的一次革命，与常规的多克隆抗体，特异性更强，灵敏度更高，并且便于大规模重复生产，*性非常明显。目前已广泛应用于科研、检测、医药等各个领域。

 

　　单克隆抗体的使用有着必须遵从的方法，这样才能达到理想的结果。

 

　　1、首先将试剂盒恢复室温（大约30分），然后用纯水把清洗液配成工作浓度。

 

　　2、取出酶标板。每个标本需要6孔，阳性对照6孔。多余的用自封袋保存，记得放入干燥剂。

 

　　3、将细胞培养上清50μl加入酶标微孔板，每个标本加6孔，阳性对照也是加6孔每孔50μl。然后每孔再加入50μl标本稀释液。贴上封板膜37℃温育30分钟。

 

　　4、弃去板内液体，洗板5遍后在不掉纤维的吸水材料上拍干或机洗5遍。再在每个标本的6孔中分别加入6种酶标二抗各100μl，通用阳性对照的6孔也一样。在加样图上或酶标板上做好标记。贴上封板膜37℃温育30分钟。

 

　　5、吸弃板内液体，洗板5遍后在不掉纤维的吸水材料上拍干或机洗5遍。每孔分别加入显色剂A和显色剂B各50μl，换一张新的封板膜贴板避光37℃显色20分钟。

 

　　6、本试剂盒特异性好一般肉眼即可观察出结果，看显色蓝的那个孔所对应的酶标二抗就知道此标本的Ig类或亚类。更可将反应终止液（每孔50μl）终止反应后用酶标仪450nm测定波长，630nm参考波长双波长测定结果，参看高值孔所对应的酶标二抗就知道此标本的Ig类或亚类。阳性对照0D小于0.5实验无效，需要重做。