半抗原偶联试剂盒实验时需要留神哪些事项

 

　　洗板时容易造成误差：因为洗板是人工洗的，所以判断什么时候洗干净了也是人为判断的，这个时候带有主观色彩，所以多清洗几次，还有就是在洗的时候孔与孔之间的液体容易交叉流动；

 

　　半抗原偶联试剂盒实验时，留神事项如下：

 

　　1.正式实验时，应分别以阳性对照与阴性对照操控实验条件，待检样品应作一式二份，以确保实验效果的准确性。有时本底较高，说明有非特异性反应，可选用羊血清、兔血清或BSA等关闭。

 

　　2.在半抗原偶联试剂盒中，进行各项实验条件的挑选是很重要的，其间包含：

 

　　（1）固相载体的挑选：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其方式可所以凹孔平板、试管、珠粒等。现在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在运用前均可进行挑选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，查询其显色反应是否均一性，据此判明其吸附功用是否出色。

 

　　（2）包被抗体（或抗原）的挑选：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时刻及其蛋白量也有必定影响,一般多选用4℃18～24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg／ml等）进行包被后，半抗原偶联试剂盒在其它实验条件相一起，查询阳性标本的OD值。挑选OD值大而蛋白量少的浓度。关于大都蛋白质来说一般为1～10μg／ml。