人白介素1受体拮抗剂是一类药物,用于干预免疫系统过度活跃引起的炎症反应。它们通过阻断人白介素1受体的结合作用,抑制白介素1信号通路的传递。白介素1(IL-1)是一种细胞因子,参与调节炎症和免疫反应。当机体免疫系统异常激活时,过量的IL-1会导致炎症反应过度增强,进而引发疾病如类风湿关节炎、炎症性肠病等。
人白介素1受体拮抗剂通过与白介素1受体结合,阻断IL-1的结合和信号传递,从而减轻炎症反应。这些药物可以减少炎症细胞释放的炎性介质,抑制炎症基因的表达,并且还能改善相关症状。它们在治疗自身免疫性疾病和其他与炎症有关的疾病中发挥重要作用,例如类风湿关节炎、强直性脊柱炎等。
【白介素1受体拮抗剂洗涤方法】
1.自动洗板机:要求注入的洗涤液为350μl,注入与吸出间隔20-30秒。确保机器运用熟练后,再投入实验中使用。
2.手工洗板:每孔加洗涤液350μl,静置30秒后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干。手工洗板时,注意加入洗液的过程中,不要造成孔间污染,从而出现跳孔的现象。
【白介素1受体拮抗剂操作步骤】
从已平衡至室温的密封袋中取出试验所需板条,未用的板条和干燥剂请放回铝箔袋内封存于2-8℃。
预留空白孔(若使用双波长读板,空白孔可以不设)。
分别将标本或不同浓度人RANKL标准品(0pg/ml孔加标准品稀释液)加入相应孔中(100μl/孔),用封板胶纸封住反应孔,37℃孵箱孵育90分钟。
提前30分钟制备生物化人RANKL抗体工作液。
洗板3次。
加入生物化人RANKL抗体工作液(100μl/孔)。用封板胶纸封住反应孔,37℃孵箱孵育60分钟。
提前30分钟制备酶结合物工作液。室温避光放置。
洗板3次。
除空白孔外,加入酶结合物工作液(100μl/孔)。用封板胶纸封住反应孔,37℃孵箱,避光孵育30分钟。
洗板5次。
加入TMB显色工作液(包括空白孔)100μl/孔,37℃孵箱,避光孵育,当标准曲线高浓度的颜色较深,有明显的颜色梯度的时候,即可终止。试验显色反应请勿超过30分钟。
加入终止液(包括空白孔)100μl/孔,混匀后即刻测量OD(450nm)值(10分钟内)。
【结果判断】
1.每个标准品和标本的OD值应减去零孔的OD值。(若不减零孔值,标准曲线的零孔应相交于Y轴)
2.手工绘制标准曲线。以标准品浓度作横坐标,OD值作纵坐标,以平滑线连接各标准品的坐标点。通过标本的OD值可在标准曲线上查出其浓度。使用专业制作曲线软件进行分析,如curve expert 1.3进行结果计算。
3.若标本OD值高于标准曲线上限,应适当稀释后重测,计算浓度时应乘以稀释倍数。
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线来计算标本含量。
【操作程序总结】
准备试剂,样品和标准品